細(xì)菌在培養(yǎng)基上的培養(yǎng)與分離技術(shù)要領(lǐng)、方法和實(shí)驗(yàn)
細(xì)菌培養(yǎng)是將細(xì)菌接種到培養(yǎng)基內(nèi),并在適當(dāng)?shù)沫h(huán)境內(nèi),使細(xì)菌生長(zhǎng)和繁殖。
分離培養(yǎng)是指從標(biāo)本中培養(yǎng)出細(xì)菌或者從混有多種細(xì)菌的標(biāo)本中將各個(gè)菌種分別同時(shí)培養(yǎng)出來(lái)。
一、基本條件:細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室;無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室;基本設(shè)備和器具;細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室。
標(biāo)本接種、培養(yǎng)、分離、鑒定及藥敏試驗(yàn)等工作都要在此完成。
1.細(xì)菌室必須安裝嚴(yán)密的門(mén)窗,以防室內(nèi)環(huán)境受到外界的污染。且室內(nèi)禁用風(fēng)扇,避免細(xì)菌的播散。
2.細(xì)菌室必須安裝供空氣消毒的紫外線燈,置于操作臺(tái)上面lm處,每天開(kāi)始工作前照射20min。對(duì)其消毒效果要定期檢查,及時(shí)更換失效的燈管。
3.室內(nèi)應(yīng)備有消毒劑,用于試驗(yàn)中發(fā)生菌液灑濺時(shí)的及時(shí)消毒處理。同時(shí)還應(yīng)備有供工作人員浸手用的盛有消毒劑的水盆、肥皂及自來(lái)水源等。
4.室內(nèi)操作臺(tái)須每日用消毒劑擦洗,地面至少一周用消毒劑擦洗l次。
5.對(duì)接收的標(biāo)本、無(wú)菌器具、用過(guò)的物品等應(yīng)明顯分開(kāi)并放在指定位置。同時(shí)要對(duì)用過(guò)的物品及時(shí)進(jìn)行滅菌處理。
6.細(xì)菌室根據(jù)當(dāng)?shù)氐臍鉁靥攸c(diǎn),安裝空調(diào)機(jī),以適合細(xì)菌實(shí)驗(yàn)工作。同時(shí)室內(nèi)應(yīng)設(shè)置必要的消防設(shè)備。
無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室是細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室內(nèi)用于無(wú)菌操作的小室,其內(nèi)部裝飾、消毒條件要求更嚴(yán)格。
1.無(wú)菌室應(yīng)*封閉,人員出入應(yīng)有兩道門(mén),其間應(yīng)隔有緩沖區(qū)。
2.用前應(yīng)以紫外線消毒30min,定期用乳酸或甲醛熏蒸,*消毒。
3.在無(wú)菌室中一般僅限于分裝無(wú)菌的培養(yǎng)基及傳染性強(qiáng)的細(xì)菌的接種,不進(jìn)行有菌標(biāo)本的分離及其他操作。
4.無(wú)菌室內(nèi)應(yīng)僅限操作人員進(jìn)入,而且進(jìn)入無(wú)菌室應(yīng)著隔離衣和專用鞋,操作時(shí)戴口罩,隨時(shí)保證室內(nèi)的無(wú)菌狀態(tài)。
5.條件有限的實(shí)驗(yàn)室,可用超凈工作臺(tái)代替無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行相應(yīng)的操作。超凈工作臺(tái)應(yīng)選擇垂直氣流通風(fēng)方式。
6.無(wú)菌室應(yīng)配備空調(diào)設(shè)備,保證不因室溫而影響工作。