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色氨酸的測定法

更新時(shí)間:2011-10-26   點(diǎn)擊次數(shù):1794次
       色氨酸:一種芳香族、雜環(huán)、非極性α氨基酸。L-色氨酸是組成蛋白質(zhì)的常見20種氨基酸中的一種,是哺乳動物的必需氨基酸和生糖氨基酸。在自然界中,某些抗生素中有D-色氨酸。

 方法名稱:本方法適用于色氨酸原料藥。
色氨酸原料藥—色氨酸的測定—電位滴定法   
應(yīng)用范圍: 本方法采用滴定法測定色氨酸原料藥中色氨酸的含量。   
方法原理: 供試品加無水甲酸溶解后,加冰醋酸,照電位滴定法,用高氯酸滴定液滴定,并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正,根據(jù)滴定液使用量,計(jì)算色氨酸的含量。   試劑:
1.無水甲酸   
2.冰醋酸   
3. 高氯酸滴定液(0.1mol/L)   
4. 結(jié)晶紫指示液   
5. 基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀   
儀器設(shè)備: 電位滴定儀   
試樣制備:
1. 高氯酸滴定液(0.1mol/L)   
配制:取無水冰醋酸(按含水量計(jì)算,每1g水加醋酐5.22mL)750mL,加入高氯酸(70~72%)8.5mL,搖勻,放冷,加無水冰醋酸適量使成1000mL,搖勻,放置24小時(shí)。若所測供試品易乙酰化,則須用水分測定法測定本液的含水量,再用水和醋酐調(diào)節(jié)至本液的含水量為0.01%~0.2%。   
標(biāo)定:取在105℃干燥至恒重的基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀約0.16g,精密稱定,加無水冰醋酸20mL使溶解,加結(jié)晶紫指示液1滴,用本液緩緩滴定至藍(lán)色,并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于20.42mg的鄰苯二甲酸氫鉀。根據(jù)本液的消耗量與鄰苯二甲酸氫鉀的取用量,算出本液的濃度。   
2. 結(jié)晶紫指示液   
取結(jié)晶紫0.5g,加冰醋酸100mL使溶解。   
操作步驟: 精密稱取供試品約0.15g,加無水甲酸3mL溶解后,加冰醋酸50mL,照電位滴定法,用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定,并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于20.42mg的C11H12N2O2。   
注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

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